食品检验或试验中稀释剂的概括介绍及细胞培养的 pH 值控制

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微生物实验常用的几种稀释剂！

在微生物检测和实验中，取样后往往需要进行一系列稀释，并使用稀释剂。本文概述了食品检测或测试中使用的几种稀释剂。

大多数细胞适合在 7.2-7.4 的 pH 范围内生长。当然，不同类型的细胞对pH值的要求不同，同一类型的细胞在不同生长阶段的最佳pH值也不同。原代培养细胞对pH值要求更严格，而传代培养细胞对pH值要求更宽。一般来说，细胞对酸性环境的耐受性比碱性环境更强。培养过程中，应严格控制培养基的pH值，以利于细胞生长。细胞生长越旺盛，新陈代谢越活跃，pH值变化越快。代谢物的滞留导致培养基变酸、变黄，不利于细胞生长。因此，通常在培养液中加入一定量的缓冲液，以保持pH值在一定范围内相对稳定。

平衡盐溶液（Salt，BSS）与细胞生长时的pH值、渗透压等环境条件一致。具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存和代谢所必需的能量和无机盐成分等作用。它满足体外实验中细胞生存和维持一定代谢的基本需要。细胞在BSS中可存活数小时，且BSS配方简单、成本低廉，因此成为制备各种组织和细胞培养液的基本溶液。也是体外组织细胞短期保存、分离、纯化、洗涤等实验操作常用的溶液。 。

磷酸盐缓冲盐水（PBS）是最常用的平衡盐溶液（BSS）之一。它由磷酸一氢盐和磷酸二氢盐的混合溶液组成，其中磷酸一氢盐呈碱性，磷酸二氢盐呈酸性。当微生物分泌酸性物质时，与磷酸一氢反应生成磷酸二氢；当它们分泌碱性物质时，与磷酸二氢盐反应生成磷酸一氢盐。这使整个系统保持在相对稳定的pH范围内。由于磷酸盐缓冲液接近中性，在生理pH范围内具有最强的缓冲能力，且其成本相对较低，已成为生命科学领域以及免疫学领域应用最广泛和流行的无机盐缓冲液，细胞生物学和分子生物学。生物实验室必需的常用缓冲液之一。

0.85%的生理盐水可以维持细胞内一致的渗透压，防止细菌细胞壁被破坏，影响细菌的生长繁殖。避免细胞破裂，使细胞在液体环境中保持正常的生理平衡。避免微生物在运行过程中失水或吸收过多水分而导致死亡。对细菌菌落总数的要求并不太高，但生理盐水对维持渗透压还是有一定作用的，特别是对于“半死半活”细菌的检测。然而，生理盐水并不适合所有情况。测试含盐量高的样品（如烤鳗鱼、酱油等）时，不宜使用生理盐水。在这种情况下，蒸馏水更合适。检测菌落总数时，SN（出口食品工业检验标准）推荐使用磷酸盐缓冲稀释液。 GB中没有明确提及，但一般推荐使用生理盐水。由于磷酸盐缓冲稀释液配制较复杂，一般情况下检测一般样品采用生理盐水，当样品含盐量较高时采用蒸馏水。

无菌水通常是灭菌的蒸馏水。用于霉菌和酵母测试的稀释剂是蒸馏水。 GB 4789.15-1994采用高盐乍得培养基，稀释样品后用生理盐水，很容易弄乱盐浓度。因此，标准制定者选择了蒸馏水。事实上，蒸馏水对单细胞原核生物和真核生物都有害。从GB/T 4789.15-2003开始，该介质已被删除。但蒸馏水没有改变。在具体工作中，最好不要使用蒸馏水来稀释样品。因为通常需要同时检测样品中的细菌和真菌，因此不可能分别称重然后分别稀释。

蛋白胨是动植物蛋白质经酶解后得到的蛋白胨、蛋白胨、肽和氨基酸的复杂混合物。吸湿性强，易溶于水，是两性电解质，具有一定的缓冲作用。有学者在自己的实验中用蛋白胨水代替磷酸盐或生理盐水进行稀​​释。目的是使样品中的细菌在稀释过程中保持活性，避免死亡，但稀释时间必须控制在15分钟以内。

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