免疫层析法原理简介及在快速免疫检测中的应用

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有色乳胶及金标免疫层析快速检测技术平台

原理介绍

免疫层析技术（）是20世纪90年代兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术，本质是将蛋白质等大分子吸附到纳米金粒子表面的包覆过程。

其吸附机理可能是纳米金粒子表面的负电荷由于静电吸附而与蛋白质的正电荷基团形成牢固的结合，吸附不会使生物分子变性。由于金粒子的电子密度高，在金标记的蛋白质结合位点，显微镜下可见黑褐色颗粒。当这些标记物在相应的配体上大量聚集时，用肉眼可见红色或粉红色斑点。因此，它被用于定性或半定量的快速免疫测定方法中。

由于球形金纳米粒子对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌蛋白A、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等进行非共价结合，使其成为基础研究和实验中非常有用的工具。

免疫层析法以NC膜为载体，利用微孔膜的毛细作用，使滴在膜条一端的液体缓慢迁移到另一端，就像层析一样。在NC膜条的下端（C）上贴有金磁粒子复合物干片，膜条测试区（T）上包被有特异性抗体，当测试条下端进入液体标本时，下端的吸水材料吸收液体并向上端移动，当流经C时，干片上的金磁粒子复合物重新溶解，带动其迁移到膜条上。如果标本带有特异性抗原，则能与金磁粒子复合物的抗体结合，形成的金标抗原抗体复合物流到测试区，被固相抗体捕获，形成抗体-抗原-金标抗体复合物。在膜上T处出现一条红色对照线。

免疫层析试纸条组成部件示意图

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